2013-09-2015-06,華中農(nóng)業(yè)大學,預防獸醫(yī)專業(yè),碩士
2013.07-2014.03     豬肺炎支原體P36蛋白單克隆抗體的制備及鑒定
將pET-28a(+)-P36成功轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)，優(yōu)化表達條件以可溶性形式高效表達；使用AKTA FPLC（Amersham Biosciences UPC-900）快速純化液相色譜系統(tǒng)對蛋白進行Ni柱親和純化；復蘇培養(yǎng)Mhp168株F109代，進行CCU測定，制備Mhp全菌蛋白用于后續(xù)單抗篩選與驗證；通過免疫小鼠、細胞融合、有限稀釋法克隆陽性細胞孔、Western blot驗證特異性得獲得雜交瘤細胞株；采用辛酸-飽和硫酸銨沉淀法對在小鼠體內(nèi)誘生的腹水進行純化，獲得4株高效價高純度的單抗。
2014.03-2014.05     建立豬肺炎支原體雙抗體夾心ELISA與熒光定量PCR檢測方法
HRP酶標單抗，使用Mhp全菌蛋白建立優(yōu)化雙抗體夾心ELISA，但無法檢測到臨床鼻拭子樣品中的Mhp；設計Mhp P36基因的熒光定量引物和探針，成功建立FQ-PCR標準曲線，但敏感性不高，課題中斷。
2014.06-2015.03     按照新獸藥申請材料開展豬肺炎支原體間接ELISA檢測試劑盒的研發(fā)
成功表達純化多批Mhp的三聯(lián)融合蛋白，用作包被抗原建立間接ELISA，增加檢測方法的敏感性；摸索ELISA方法的最佳反應條件，判定陰陽性界值，評價方法的特異性、敏感性、重復性和穩(wěn)定性；將所建立的ELISA方法與IDEXX試劑盒共同檢測大量臨床血清樣品，結(jié)果符合率高。

2008-09-2013-06,華中農(nóng)業(yè)大學,動物醫(yī)學專業(yè),本科
2012.11-2013.04     豬圓環(huán)病毒2型 ORF2基因在昆蟲細胞中的表達及其優(yōu)化
PCR擴增ORF2基因，成功構建pVL1392-ORF2表達質(zhì)粒；熟悉掌握Sf9昆蟲細胞的傳代培養(yǎng)；將表達質(zhì)粒與線性化桿狀病毒DNA共轉(zhuǎn)染Sf9，經(jīng)多次擴增獲得高滴度的重組病毒；Western blot檢測不同感染復數(shù)下細胞培養(yǎng)液上清和細胞內(nèi)的蛋白表達量。