食品和飼料中三聚氰胺檢測方法有哪些？
2三聚氰胺的檢測方法
三鹿奶粉事件后，我國迅速出臺了奶粉和飼料中的三聚氰胺檢測方法，《GBT22388-2008原料乳及乳制品中三聚氰胺檢測方法》和《NYT1372—2007飼料中三聚氰胺的測定》。實際檢測中發現某些樣品雖然沒有檢出三聚氰胺，但可以發現其類似物。我國只檢測三聚氰胺，而美國、日本等國要求同時檢測三聚氰胺及其同系物。胺和酸為二類化合物，很難同時分析，二次檢測成本和時間不容許。美國FDA采用ZIC-HILIC色譜柱pH梯度和濃度梯度LC-MS法實現了二者的同時檢測。到目前為止，三聚氰胺的檢測方法有傳統的苦味酸法和升華法，還有電位滴定法、色譜法、色譜-質譜聯用法、酶聯免疫法、毛細管電泳法、近紅外吸收法等。
2.1苦味酸法與升華法
苦味酸法三聚氰胺完全升華后，稱其殘渣量，即測得三聚氰胺純度。這兩種方法準確度均較高，且對儀器要求較低，但操作繁瑣，分析時間太長，不適合于生產中間控制分析中測定溶液中三聚氰胺的含量。
2.2電位滴定法
電位滴定法原理是先測定三聚氰胺溶液中總固體的含量，用硫酸標準溶液滴定熱溶液至pH為5，流水冷卻溶液至室溫，滴定直至pH為3。根據消耗硫酸標準液的體積計算結果。該法操作簡便，結果準確，但不適于現場和多個樣品的檢測。食品基質中化學組成比較復雜，運用此法時準確度會受到影響。陳一虎對同一試樣進行多次平行測定，測定結果的變異系數為0.98%，在試樣中加入標準樣品0.12500g進行回收率實驗，回收率在89.28%至93.80%之間。
2.3試劑盒檢測法(酶聯免疫法，ELISA)
ELISA是用三聚氰胺HRP酶耦合物作為標準品，與樣品中萃取的三聚氰胺同時放入多孔試劑板上。經過30min的培養，樣品中的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物與三聚氰胺抗體競爭性結合。經過這30min的培養，任何沒有結合的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物將被沖洗掉，顯色酶底物加入微孔中，任何結合的酶耦合物都會使液體呈現藍色。等反應結束后，用酶標儀讀數，再將未知樣品的讀數和標準品的讀數比較，就能得出樣品中的三聚氰胺濃度。酶聯免疫法可以滿足日常食品衛生執法中檢測三聚氰胺項目的要求，具有低成本、高通量檢測三聚氰胺項目的優勢，每次能檢測多個樣品，這是其他三聚氰胺檢測方法所無法比擬的，而且不需要非常昂貴、復雜的儀器，樣品制備過程簡捷，技術操作方便，檢測時間不超過2h，檢測范圍為20～500ng/mL。但是檢測樣品中如果存在與三聚氰胺類似的物質，則有可能會干擾實驗結果，需要采用HPLC、HPLC-MS、GC-MS方法做進一步的精確分析。目前，進口的三聚氰胺ELISA檢測試劑盒，有BeaconAnalyticalSystems公司的BeaconMelaminePlateKit、Abraxis公司的MelaminePlatekit、StrategicDiagnostics公司的EnviroGardTriazinePlatekit等。國產的三聚氰胺ELISA檢測試劑盒有中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所開發的檢測三聚氰胺的酶聯免疫試劑盒等。
2.4液相色譜檢測法
液相色譜法可對食品和飼料中三聚氰胺進行定性和定量分析，具有操作簡單、靈敏度高，測定周期短等優點。陳垂鳳用高效液相色譜法建立了乳制品中三聚氰胺的檢測方法。采用XBP-C8柱(250.0mm×4.6mm，5.0μm)，流速為1.0mL/min，柱溫為40℃，進樣量為20μL，流動相為檸檬酸+辛烷磺酸鈉+乙腈+堿性水(25.000%～28.000%的NH3•H2O調pH為3.0)。測定線性范圍為2.00～10.00mg/kg。
吳彩梅等建立采用固相萃取凈化，高效液相色譜法測定雞蛋中三聚氰胺含量的方法。樣品采用三氯乙酸和乙酸鉛溶液提取，經優化實驗，確定樣品提取20min，采用C-C18(4.6mm×
150mm，5μm)色譜柱和PCX固相萃取柱。采用紫外檢測器，檢測波長為240nm，流動相為乙腈:辛烷磺酸鈉-檸檬酸緩沖液(10:90，v/v)，流速1.0mL/min，進樣量20μL，外標法定量。三聚氰胺在1～50μg/mL范圍內，具有良好的線性關系，在添加質量濃度為5～20mg/kg范圍內，三聚氰胺添加回收率在72.8%～87.6%，RSD(n=6)為1.5%～4.0%，最低檢測限為0.54mg/kg。